Zerur belogyny sellýuloza asetat membranasynyň elektroforezi bilen bölmek üçin synag

Ipleörelge

Sellýuloza asetat film elektroforezi, sellýuloza asetat filmini goldaw hökmünde ulanyp, elektroforez usulydyr. Zarýadlanan bölejikleriň elektrik meýdanynyň täsiri astynda ters elektroda tarap hereket edýän hadysasyna elektroforez diýilýär. Her belogyň belli bir izoelektrik nokady barlygy sebäpli, bir belok izoelektrik nokadyndan pH pes ergin bilen ýerleşdirilse, belok pololyitel zarýad alar we otrisatel elektroda tarap hereket eder. Munuň tersine, polo positiveitel polýusa geçýär. Elektrik meýdanynda hereket edýän belok molekulalarynyň tizligi olaryň zarýady, molekulalaryň görnüşi we ululygy bilen baglanyşykly bolany üçin, dürli beloklary elektroforez bilen bölüp bolýar. Serumda dürli beloklar bar, bularyň hemmesiniň pH7.5 ýa-da ondanam pes izoelektrik nokatlary bar. Zardyň elektroforezi işletmek üçin pH 8.6 buferine ýerleşdirilende, ähli serum beloklary otrisatel zarýadlanýar we elektrik meýdanyndaky oňyn tarapa geçer. Dürli serum beloklarynyň şol bir pH-de dürli zarýadlary bolansoň, molekulýar bölejikler ululygy bilen tapawutlanýar we şeýlelik bilen göçüş tizligi başga, elektroforez bilen bölünýär. Serum beloklarynyň izoelektrik nokatlary we molekulýar agramlary aşakdaky tablisada görkezilýär:

Belok

Izoelektrik nokatlary (PI)

Molekulýar agram

Albumin

4.88

69 000

α1-gloulin

5.00

200 000

α2-gloulin

5.06

300 000

β-gloulin

5.12

9 000 ~ 150 000

γ-gloulin

6.85 ~ 7.50

156 000 ~ 300 000

1

Synag, gan seriýasyndaky dürli beloklary sellýuloza asetat membranasy (abbr. CAM) bilen goldaw serişdesi hökmünde bölmekdir. CAM köpükli görnüşleriň bir görnüşidireoňat eşikli film we galyňlygy belli bir suw siňdirişine eýe bolan 0,1mm-1,5mm.

CAM elektroforezi üçin materiallar, gurallar we reagentler

Nusgalar:sagdyn adam gany

Gural:elektrik üpjünçiligi DYY-6C, elektroforez tanky DYCP-38C, ýokary derejeli ýükleme WD-9404

1-4

Reagentler

1) sellýuloza asetat membranasy 7X9 sm

2) PH 8.6 barbitol bufer ergini (ion güýji 0.05-0.09, bu 0.06tid wagt.): 1,84g Dietil barbitur turşusyny alyň, soňra bolsa 1.03g Dietil natriý pentobarbital alyň, eremek üçin biraz distillendirilen suw goşuň we eremeli. 1000ml çenli;

3) menek: Ponceau S 0.2g, Trihloroasetik 3g, 100ml distillendirilen suw goşuň;

4) TBS / T ýa-da PBS / T: 45ml 95% etanol, 5ml buzly sirke kislotasy, 50ml distillendirilen suw goşuň;

5) Arassalaýyş çözgüdi: 70ml suwuk etanol, 30ml buzly sirke kislotasy.

Synag usulyd

1) Membranany taýýarlaň: Membranany barbitol bufer erginine 30min-8h çümdüriň we çykaryň, goşmaça ergini sorujy kagyz bilen aýyryň.

2) Samükleme nusgalary: Membrananyň gödek tarapyny we tekiz tarapyny tapawutlandyryň we gödek tarapyň ýokarky ujuna 1,5 sm aralykda çyzyk belläň. Gödek tarapdan ýokary nusga ýüklemek guraly bilen nusgalary ýükläň. Bellik: Nusgalary membrananyň gödek tarapyna ýüklemeli. Zardyň nusgalary membrana doly aralaşandan soň, membranany öwüriň, gödek tarapyny (nusgalar bilen) bakyň aşagyna goýuň we nusgalar bilen soňy negatiw elektroda ýerleşdirilýär.

3) Elektroforez: Elektrik üpjünçiligini açyň, 0,40,6m A / sm membrana, işleýiş wagty 30-45 min. Elektroforez işledilenden soň, toguny öçüriň.

4) Dok we arassa: Membranany tankdan çykaryň we çümdüriňit boýag erginine 5 minut, soňra arassalaýjy erginde fon reňki açyk bolýança 3-4 gezek arassalaň. Zardyň beloklary zolaklarda görkezilmelidir we adatça bellenen çyzygyň ýokarky ujuny emele getirýän bäş zolak bar, Albumin, α1-gloulin, α2-gloulin, β-gloulin, γ-gloulin.

5) Gorap saklamak: gury elektroforezi goýuňtoparyarassalaýjy erginde 10-15 minut, soň bolsa çykaryň we arassa stakana ýapyň, guradylandan soň aç-açan film bolar.topary.

SynagNetije

1-3

Zardyň nusgalarynyň bölüniş täsiri gowy, we guýruk guýmak hadysasy ýok. Netijeleriň gaýtalanmagy synag proseduralary we eksperimentçiniň usullary sebäpli üýtgeýär we gaýtalanma derejesi ýokary.

Netije

Çalt kliniki elektroforezi kesgitlemek ulgamy (Elektroforez tankyDYCP-38C,elektrik üpjünçiligiBiziň öndüren DYY-6C we has ýokary nusga ýükleme WD-9404)kompaniýasy Pekin Liuyi Biotehnologiýa Co., Ltd.synag talaplaryna laýyk gelýär,wenetijeler köpelýär, ýönekeý we çalt, amatlyöwretmekgözleg.

Pekin LiuyiBiotehnologiýa Co., Ltd durmuş ylmy pudagy üçin elektroforez önümlerini öndürmekde ýöriteleşendirHytaýda 50 ýyldan gowrak taryhy bar we bu kompaniýa bütin dünýäde durnukly we ýokary hilli önümler bilen üpjün edip biler. Birnäçe ýyllyk ösüşiň dowamynda, bu siziň saýlamagyňyzdyr!

Indi hyzmatdaş gözleýäris, OEM elektroforez tanky we paýlaýjylar garşylanýar.

Biz hakda has giňişleýin maglumat üçin e-poçta arkaly habarlaşmagyňyzy haýyş edýäris[e-poçta goralýar]ýa-da[e-poçta goralýar].


Iş wagty: Noýabr-14-2022