Poliakrilamid gel elektroforezi näme?

Poliakrilamid gel elektroforezi

Gel elektroforezi, DNK, RNK we beloklar ýaly makromolekulalaryň bölünmegine rugsat berýän biologiki dersler boýunça barlaghanalarda esasy usuldyr. Dürli aýralyk serişdeleri we mehanizmleri bu molekulalaryň böleklerini fiziki aýratynlyklaryndan peýdalanyp has netijeli bölmäge mümkinçilik berýär. Esasanam beloklar üçin poliakrilamid gel elektroforezi (PAGE) köplenç saýlamagyň usulydyr.

SAHYPA, elektroforetiki hereketine esaslanýan beloklar ýaly makromolekulalary bölýän usul, ýagny analitikleriň ters zarýadyň elektrodyna tarap hereket etmek ukybydyr. SAHYPADA, bu molekulanyň zarýady, ululygy (molekulýar agramy) we görnüşi bilen kesgitlenýär. Analitikler poliakrilamid jelinde emele gelen gözeneklerden geçýär. DNK we RNK-dan tapawutlylykda beloklar, işleýşine täsir edip biljek aminokislotalara görä dürli-dürli bolýar. Aminokislotalar setirleri, görünýän ululygyna we gözeneklerden nädip hereket edip biljekdigine täsir edýän ikinji derejeli gurluşlary emele getirip biler. Şonuň üçin ululygyna has takyk baha berilmegi zerur bolsa, elektroforezden öň beloklary hatarlamak islenip biler.

SDS SAHYPA

Natriý-dodekil sulfat poliakrilamid gel elektroforezi 5 - 250 kDa massalaryň belok molekulalaryny aýyrmak üçin ulanylýan usuldyr. Beloklar diňe molekulýar agramy esasynda bölünýär. Belok nusgalarynyň içerki zarýadlaryny maskalaýan we köpçülikleýin gatnaşyga meňzeş zarýad berýän jeller taýýarlanylanda, anion surfaktant bolan natriý dodekil sulfat goşulýar. Simpleönekeý söz bilen aýdylanda, beloklary bölýär we otrisatel zarýad berýär.

Nativeerli sahypa

PAerli PAGE beloklary bölmek üçin denatirlenmedik jelleri ulanýan usuldyr. SDS PAGE-den tapawutlylykda, jel taýýarlanylanda hiç hili denatirleýji serişde goşulmaýar. Netijede, beloklaryň bölünişi beloklaryň zarýady we ululygy esasynda bolup geçýär. Bu usulda, beloklaryň konformasiýasy, bukulmagy we aminokislotalar zynjyrlary, bölünişige bagly faktorlardyr. Bu amalda beloklar zaýalanmaýar we aýralyk gutarandan soň dikeldilip bilner.

Poliakrilamid gel elektroforezi (PAGE) nähili işleýär?

PAGE-iň esasy ýörelgesi, elektrik toguny ulanyp, poliakrilamid jeliniň gözeneklerinden geçip, analitikleri bölmekdir. Muňa ýetmek üçin ammiak persulfatyň (APS) goşulmagy bilen akrilamid - bisakrilamid garyndysy polimerizasiýa edilýär (poliakrilamid). Tetrametiletilenediamin (TEMED) tarapyndan katalizlenen reaksiýa, analitikleriň hereket edip bilýän gözenekleri ýaly tor emele getirýär (2-nji surat). Jeliň düzümine girýän akrilamidiň göterimi näçe ýokary bolsa, gözenegiň ululygy şonça-da az bolup biler, şonuň üçin geçip bilýän beloklar şonça-da azdyr. Akrilamidiň bisakrilamid bilen gatnaşygy gözenegiň ululygyna hem täsir eder, ýöne bu köplenç hemişelik saklanýar. Ownuk gözenek ululyklary kiçi beloklaryň jelden geçip bilýän tizligini peseldýär, çözgüdini gowulandyrýar we tok ulanylanda buferiň çalt gaçmagynyň öňüni alýar.

Poliakrilamid gel elektroforezi üçin enjamlar

Gel elektroforez öýjügi (tank / palata)
Poliakrilamid gel elektroforezi (PAGE) üçin jel tanky, agarose gel tankyndan tapawutlanýar. Agarose gel tanky keseligine, PAGE tanky bolsa dikligine. Wertikal elektroforez öýjügi (tank / kamera) bilen iki aýna plastinanyň arasyna inçe jel (adatça 1,0mm ýa-da 1,5mm) guýulýar we jeliň aşagy bir kamerada buferde, ýokarsy bolsa buferde suwa düşýär başga bir otagda. Tok ulanylanda az mukdarda bufer ýokarky kameradan aşaky otaga geçýär. Gurluşyň dik durmagyny kepillendirmek üçin berk gysgyçlar bilen enjam, aýratyn zolaklara sebäp bolýan hatda sowadyş bilen çalt jeliň işlemegini aňsatlaşdyrýar.

Pekin Liuyi Biotehnologiýa Co., Ltd. DYCZ-20C we DYCZ-20G modelleri, DNK yzygiderliligini derňemek üçin dik elektroforez öýjükleri (tanklar / kameralar). Dik dik elektroforez öýjükleriniň käbiri (tanklar / kameralar), DYCZ-24DN, DYCZ-25D we DYCZ-25E modeli, DYCZ-40D, DYCZ-40G we DYCZ-40F, blotlama ulgamyna laýyk gelýär. belok molekulasyny jelden membrana geçirmek üçin ulanylýar. SDS-PAGE elektroforezinden soň, Western Blotting belok garyndysynda belli bir belogy tapmagyň usulydyr. Synag talaplaryna laýyklykda bu partlaýyş ulgamlaryny saýlap bilersiňiz.

Elektroforez elektrik üpjünçiligi
Jeli işletmek üçin elektrik üpjünçiligi üçin size elektroforez elektrik üpjünçiligi gerek bolar. Liuyi biotehnologiýasynda ähli amaly programmalar üçin birnäçe elektroforez elektrik üpjünçiligini hödürleýäris. DYY-12 we DYY-12C modeli ýokary durnukly naprýa andeniýe we tok bilen ýokary woltly talap elektroforezi kanagatlandyryp biler. Onda durmak, wagt, VH we ädimme-ädim ulanmak funksiýasy bar. IEF we DNK yzygiderli elektroforez amaly üçin amatly. Umumy belok we DNK elektroforezi ulanmak üçin, DYY-2C, DYY-6C, DYY-10 we ş.m. modelimiz bar, olar hem elektroforez öýjükleri (tanklar / kameralar) bilen gyzgyn satuw güýji bolup durýar. Bular orta we pes woltly elektroforez programmalary üçin ulanylyp bilner, mysal üçin mekdep laboratoriýasy, hassahananyň laboratoriýasy we ş.m. Elektrik üpjünçiligi üçin has köp model, web sahypamyza girmegiňizi haýyş edýäris.

Liuyi markasynyň Hytaýda 50 ýyldan gowrak taryhy bar we bu kompaniýa bütin dünýäde durnukly we ýokary hilli önümler bilen üpjün edip biler. Yearsyllaryň ösüşi bilen, bu siziň saýlamagyňyzdyr!

Biz hakda has giňişleýin maglumat üçin e-poçta arkaly habarlaşmagyňyzy haýyş edýäris[e-poçta goralýar] or [e-poçta goralýar].

Poliakrilamid gel elektroforezi näme?
1. Karen Stýuard PhD Poliakrilamid gel elektroforezi, işleýşi, tehniki görnüşleri we ulanylyşy